細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。無血清培養(yǎng)基不加動物血清，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子，激素等。

　　有許多細胞系是相對容易適應(yīng)無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基的，而對環(huán)境變化相對敏感的其它細胞則難以適應(yīng)變化，這就需要更為專業(yè)的方法來讓細胞適應(yīng)環(huán)境變化。

　　而根據(jù)細胞系的特性，有兩種方法可使細胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。第一種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法；另一種方法是直接適應(yīng)。

　　在適應(yīng)過程中，細胞通常對PH和溫度變化較為敏感。讓細胞在每個階段都至少有一個適應(yīng)過渡期。

　　細胞存活率和細胞密度

　　細胞在對數(shù)生長期中期快速分裂，且在適應(yīng)過程開始時，存活率大于90%。這一點至關(guān)重要。當(dāng)細胞需傳代時，建議采用1:2或1:3的小傳代比例，以維持更高的細胞密度，同時提供隔絕期間可能有助于細胞的細胞生長因子。

　　當(dāng)細胞適應(yīng)新的培養(yǎng)條件時，在增大細胞傳代密度。

　　細胞生長

　　如果在適應(yīng)過程中，細胞停止了生長，則需讓細胞有更多的時間來適應(yīng)培養(yǎng)基組合。例如，在方法1的階段4，向無血清培養(yǎng)基添加少量的血清(1-3%)。這樣有助于細胞更容易地適應(yīng)新的培養(yǎng)基。

　　然后，在幾個過渡期內(nèi)，緩慢地減少血清量，直至學(xué)清量為0。

　　懸浮培養(yǎng)物

　　一些公司的無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基不含血清中所發(fā)現(xiàn)的細胞貼壁因子。在一段過渡期內(nèi)，貼壁細胞將開始離開表面，并成為懸浮細胞系開始生長。細胞也可能因適應(yīng)而發(fā)生形態(tài)變化。監(jiān)測細胞的生長速度，只要細胞能夠與新系統(tǒng)相融合，任何形態(tài)變化都不重要。

　　細胞叢

　　在適應(yīng)于無血清培養(yǎng)期間，細胞容易形成叢。傳代培養(yǎng)時，將叢輕輕折斷，使其分散開。將培養(yǎng)物從靜止細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)移到可旋轉(zhuǎn)錐形瓶內(nèi)，這樣可能會有助于防止細胞叢的形成。

　　抗生素

　　由于血清蛋白易于粘合到抗生素上，因此，不建議在無血清適應(yīng)過程中使用抗生素。如不存在血清蛋白，則抗生素水平可能會對細胞產(chǎn)生毒性。

　　預(yù)防措施

　　確保在開始適應(yīng)過程前，儲存有大量原培養(yǎng)基的細胞。如果細胞沒有存活到下一階段，則在整個過程中保存每一階段使用的培養(yǎng)瓶。