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技術(shù)文章

無血清免疫細胞培養(yǎng)基的研究有兩個方向

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   無血清免疫細胞培養(yǎng)基是繼天然培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基之后的第三類培養(yǎng)基。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比較,無血清培養(yǎng)基是不含動物血清或其他生物提取液,但仍可以維持細胞在體外較長時間生長、繁殖的一種培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基由于其組成成分相對清楚,制備過程簡單,在現(xiàn)代生物技術(shù)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。無血清培養(yǎng)技術(shù)也是闡明細胞生長,增值,分化及基因表達調(diào)控的基礎(chǔ)研究問題的有力工具。
  
  通常,動物細胞的生長均有賴于血清的存在,在普通培養(yǎng)基中,如不加血清,絕大部分細胞不能增殖。目前,血清培養(yǎng)基中通常添加的比較好的血清是牛血清。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)中使用牛血清存在污染外源病毒和致病因子的風(fēng)險:由于不同批次牛血清間的生物活性和因子的不一致,導(dǎo)致產(chǎn)品和實驗結(jié)果的重現(xiàn)性差:制品中殘留的牛血清易引起接種者對血清的過敏反應(yīng)。
  
  目前,無血清免疫細胞培養(yǎng)基的研究有兩個方向:一是培養(yǎng)基中不含有任何動物來源的添加組分;二是培養(yǎng)基中不含有不明確的添加組分。依此可以將當(dāng)前應(yīng)用較多的無血清培養(yǎng)基歸納為以下四種:
  1、一般意義上的無血清培養(yǎng)基,用各類可代替血清功能的生物材料配制細胞培養(yǎng)基,如牛血清白蛋白(BSA),轉(zhuǎn)鐵蛋白,胰島素等生物大分子物質(zhì),以及從血清中提取的去除蛋白質(zhì)的混合脂類以及水解蛋白等。其特點是培養(yǎng)基中的蛋白含量較高,添加物質(zhì)的化學(xué)成分不明確,其中含有大量的動物來源蛋白。
  
  2、無動物來源培養(yǎng)基:許多商業(yè)公司開發(fā)的無動物來源培養(yǎng)基是基于生產(chǎn)重組藥物的安全考慮,培養(yǎng)基中的添加組分無動物來源,需要的蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細胞生長及增殖的需要。
  
  3、無動物蛋白培養(yǎng)基:培養(yǎng)基*不用動物來源的蛋白,但仍有部分添加物是來源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此類培養(yǎng)基組分相對穩(wěn)定,但必須添加類固醇激素和脂類前體,并且對培養(yǎng)的細胞是高度特異性的。
  
  4、化學(xué)組分限定培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基是目前安全的,最為理想的培養(yǎng)基,首先可以保證培養(yǎng)基批次間的一致性,其中所添加的少量動物來源的蛋白水解物、蛋白都是成分明確的組分。其特點是培養(yǎng)基的性質(zhì)確定,配起培養(yǎng)基來也比較方便。

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